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多肽合成-多肽定制

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多肽的溶解和保存

Mimotopes 2023-08-14

我們化學合成的多肽以凍干的形式提供。以下是我們經(jīng)驗豐富的多肽合成工程師整理的多肽保存技巧和使用時的多肽溶解建議,用以保持合成肽的完整性和活性。

多肽保存和處理

凍干多肽通常是穩(wěn)定的,可在常溫條件下運輸。收到后,我們建議將多肽存放在冷凍干燥的地方。一般情況下,凍干肽可在室溫下保存最多 1 個月,在冰箱中冷藏保存最多 1 年,需要長期保存時需要在-20℃以下保存。

將凍干多肽從冰箱中取出時,打開多肽瓶之前讓小瓶升溫至室溫,以防止大氣中的水凝結(jié)到多肽上。因為多肽通常具有吸濕性并且容易潮解。因此,為了防止多肽粉吸潮降解或者使多肽難以處理,我們建議根據(jù)您的實驗要求對肽進行等分,并避免重復凍和頻繁打開多肽包裝瓶。 

含有 Cys、Met Trp 殘基的多肽,容易氧化,這可能會導致多肽變色(褐變),時間久了可能會失去活性。因此,建議避免講多肽暴露于空氣中。

儲存在溶液中的多肽穩(wěn)定性較差,也容易受到微生物的影響。因此,我們建議使用 pH 5-6 的無菌緩沖液來溶解肽、等分樣品,并在不使用時將溶液儲存在 -20°C 下。使用 0.2 μm 過濾器過濾多肽溶液也可能有助于去除細菌污染。為了長期保存,還可以將多肽再次冷凍干燥以除去溶劑。

為了方便您的研究,我們可以提供多肽分裝,方便使用。如需多肽合成報價,請與聯(lián)系我們,我們會盡快給您回復。

多肽溶解

無錫邁默拓普生物科技有限公司提供的多肽以凍干形式提供,在用于各種檢測之前需要溶解。尋找一種能夠完全溶解多肽而不影響其穩(wěn)定性,還能與實驗兼容的溶劑可能是一個困難且費力的過程。以下是我們的多肽化學家提供的多肽溶解度測試提示。

多肽溶解的技巧

多肽的溶解度主要由肽序包含的氨基酸的物理性質(zhì)決定的。氨基酸有疏水性和親水性之分。疏水性氨基酸多的肽很難溶解在水中,可能需要使用有機溶劑。親水性氨基酸殘基越多,多肽就越容易溶解在水溶液中。氨基酸還有酸性堿性的差別,酸性多肽在堿性條件下在較高 pH 值下更易溶解,而整體呈堿性的肽在較低 pH 值下最易溶解。下面是確定多肽溶解最佳溶劑的操作建議。

·         進行溶解度測試時使用少量多肽,通常1毫克的量就可以了。

·         首次溶解未知溶解度的肽時,先從揮發(fā)性溶劑開始。方便將其從緩沖液中通過凍干去除,并在必要時再次嘗試溶解。

·         計算多肽的凈電荷,以確定肽是酸性還是堿性,并決定使用的最佳緩沖液 pH 條件。 

如果多肽的凈電荷為正,則該肽呈堿性,可以用 10-30% 的乙酸溶液進行測試。相反,如果凈肽電荷為負,則認為肽呈酸性,建議使用 0.5% 氫氧化銨溶液。如果您的多肽含有二硫鍵,請勿使用后一種方法,因為高 pH 值可能會導致二硫鍵斷開。

·         對于中性肽,首先使用有機溶劑,例如乙腈、甲醇或異丙醇。對于疏水性很強的肽,二甲基亞砜 (DMSO) 在溶解肽方面特別有用,并且具有細胞耐受性的優(yōu)點。但DMSO很難通過干燥除去,因此最好在多肽原液中加入少量高純級DMSO直至溶解,然后緩慢加入水或緩沖溶液稀釋DMSO的含量。持續(xù)且溫和的攪動。如果多肽開始沉淀出來,則停止加水。使用其他有機溶劑時也可以用此操作流程。

·         注意,DMSO不適用于含有半胱氨酸的多肽,因為它會促進二硫鍵的形成。對于含有半胱氨酸的肽,可以使用DMF代替。

·         溫和加熱和超聲處理有助于多肽溶解。對易于聚集的多肽,添加離液劑(例如 6 M 鹽酸胍或 8 M 尿素)可能有助于破壞氫鍵并防止多肽凝膠化。

·         完全溶解的多肽為透明溶液。溶液渾濁,或者如果可以觀察到顆粒,則表明多肽仍處未完全溶解狀態(tài),需要進一步測試。

我們的多肽合成工程師擁有多年的多肽合成研究經(jīng)驗,多肽溶解度測試,是我們多肽定制合成服務的一部分,如需要,請聯(lián)系我們。