什么是多肽修飾

多肽是生物體內(nèi)實(shí)現(xiàn)各種功能的活性物質(zhì)，多肽修飾主要是肽鏈主鏈結(jié)構(gòu)和側(cè)鏈基團(tuán)的修飾。通過修飾能夠改變肽類化合物的物理化學(xué)性質(zhì)，優(yōu)化其在體內(nèi)的有效利用。經(jīng)過修飾的多肽類藥物，能夠顯著降低免疫原性、減少毒負(fù)作用、增加水溶性、延長體內(nèi)作用時(shí)間、改變體內(nèi)分布狀況等等。常見的肽修飾包括：C末端修飾、N末端修飾、中間殘基修飾，以及環(huán)化修飾。

常用的多肽修飾

• 多肽N端修飾

  多肽肽可以在N端進(jìn)行修飾。如通過N端乙酰化可以去除多肽電荷使其更趨向于蛋白質(zhì)的自然結(jié)構(gòu)，同時(shí)增強(qiáng)了多肽對肽鏈內(nèi)切酶的抵抗力。



• 多肽C端修飾

  多肽C端修飾是指多肽的C端與胺類化合物反應(yīng)形成酰胺，這種修飾可以防止酶降解，模擬天然蛋白質(zhì)，并在某些情況下去除肽 C 端的氫鍵。



• 二硫鍵修飾肽

  富含二硫化物的環(huán)肽及其二硫鍵通常作為藥物發(fā)現(xiàn)中的先導(dǎo)化合物或框架。它可以提高蛋白酶的效力、剛性、靶向選擇性和穩(wěn)定性，并穩(wěn)定多肽的二級結(jié)構(gòu)。



• 非天然氨基酸修飾

  非天然氨基酸的引入會在肽的二級和三級結(jié)構(gòu)中產(chǎn)生修飾，并用于進(jìn)一步增強(qiáng)肽序列的穩(wěn)定性和活性。



• 熒光修飾多肽

  熒光修飾可以通過共價(jià)鍵的形式連接在多肽序列的N端或C端，但是更推薦在N端進(jìn)行修飾。 熒光標(biāo)記肽結(jié)合成像技術(shù)后可用于識別特定靶點(diǎn)。共聚焦或熒光顯微鏡的體外成像仍然是研究細(xì)胞內(nèi)各種生物過程和相互作用十分有效的方法之一。與蛋白質(zhì)不同，這些肽定位于肌動(dòng)蛋白上的特定靶點(diǎn)，不易聚集蛋白質(zhì)，因此非常適合于體外跟蹤。同樣，F(xiàn)ITC標(biāo)記的CPP也可被用于細(xì)胞內(nèi)組分的成像，且其細(xì)胞毒性低。



• 多肽PEG修飾

  PEG聚合體具有非離子性的、無毒性的、無生物排斥、高親水性的等，PEG修飾通過化學(xué)方法將PEG聚合物偶聯(lián)到大分子上（抗體、多肽等）。PEG修飾的大分子具有較高的溶解性及生物藥效，可通過偽裝多肽,騙過宿主細(xì)胞的免疫系統(tǒng)，來增強(qiáng)多肽的治療效果。它也可以通過降低腎臟清除率來延長多肽的代謝時(shí)間。



• 磷酸化修飾

  磷酸化多肽主要指Ser、Tyr和Thr殘基在肽鏈上的側(cè)鏈羥基被修飾為酸型磷酸酯多肽。多肽磷酸化是研究蛋白質(zhì)磷酸化過程的重要手段，因此研究蛋白質(zhì)和多肽磷酸化反應(yīng)以及確定簡單、成熟的蛋白質(zhì)磷酸化反應(yīng)具有重要意義。



• KLH, BSA,OVA多肽偶聯(lián)

  多肽抗原由于分子太小而不能產(chǎn)生顯著的免疫反應(yīng)，因此需要將多肽抗原偶聯(lián)到BSA、OVA、KLH等較大的蛋白載體上。KLH由于在ELISA或Western blotting檢測中沒有抑制作用，所以不影響檢測結(jié)果。常用的偶聯(lián)原理是馬來酰亞胺法，即將多肽中的半胱氨酸殘基與載體蛋白偶聯(lián)。因此合成抗原多肽時(shí)，在其N端或C端添加一個(gè)半胱氨酸殘基有利于多肽與載體蛋白的偶聯(lián)。



• 生物素化多肽

  生物素化肽在免疫測定研究中非常有用，例如將肽連接到親和素包被的微量滴定板上。在 Fmoc 的固相合成中，生物素可以連接到肽的 N 端或連接到賴氨酸 (Lys) 或谷氨酸 (Glu)的側(cè)鏈。



• 甲基化化多肽

  甲基化多肽合成是一種用于生產(chǎn)多肽的技術(shù)，它可以用于制備多種多肽，包括蛋白質(zhì)、抗原、抗體、藥物載體和抗病毒藥物等。甲基化多肽合成技術(shù)的基本原理是將甲基化的氨基酸殘基與多肽鏈接起來,從而形成多肽。